化學(xué)發(fā)光免疫分析儀結構與工作原理簡(jiǎn)介將發(fā)光物質(zhì)直接標記在抗原或抗體上,或使酶作用于發(fā)光底物上,利用發(fā)光信號測量?jì)x器測量出發(fā)光物質(zhì)或酶反應底物上光子的數量,就可以得到免疫反應時(shí)的被測物質(zhì)的濃度在單光 ... 化學(xué)發(fā)光免疫分析儀結構與工作原理簡(jiǎn)介
將發(fā)光物質(zhì)直接標記在抗原或抗體上,或使酶作用于發(fā)光底物上,利用發(fā)光信號測量?jì)x器測量出發(fā)光物質(zhì)或酶反應底物上光子的數量,就可以得到免疫反應時(shí)的被測物質(zhì)的濃度
在單光子計數器問(wèn)世之前,人們大多采用光度計作為光信號的主要檢測儀器,其原理為通過(guò)光電轉換器件將光信號轉換為電壓或電流信號,再加以放大。其主要特點(diǎn)為:結構簡(jiǎn)單、性能穩定,但靈敏度低、線(xiàn)性范圍較窄。目前常見(jiàn)的光學(xué)檢測儀器,如:紅外/可見(jiàn)光/紫外分光光度計、熒光分光光度計、酶標儀、照度計等均采用類(lèi)似原理。這類(lèi)技術(shù)主要采用光敏二極管、光敏電池、光電偶合器(CCD),或者以光電流放大方式工作的常規光電倍增管作為檢測器件。
當發(fā)現失控信號時(shí),首先確保化學(xué)發(fā)光免疫分析儀運行正常,可以考慮采用如下步驟去分析原因并處理:
1.復查測定同一批質(zhì)控品。化學(xué)發(fā)光免疫分析儀的質(zhì)控品往往是復溶后-20℃冰凍保存,復查時(shí)一定要保證質(zhì)控品解凍時(shí)間充分并充分混勻。此步主要用以查明人為誤差,還可以查出偶然誤差。重測的結果應在允許范圍內。如果重測結果仍不在允許范圍,則可以進(jìn)行下一步操作。
2.新溶一瓶質(zhì)控品,復查失控項目。確認化學(xué)發(fā)光免疫分析儀的定標曲線(xiàn)在穩定期內進(jìn)行該操作。如果新溶的質(zhì)控血清結果在允許范圍內,那么考慮原來(lái)的質(zhì)控血清可能過(guò)期、放置時(shí)間過(guò)長(cháng)而變質(zhì)、儲存環(huán)境出現問(wèn)題或者被污染等。如果結果仍不在允許范圍,則進(jìn)行下一步。
3.新開(kāi)一盒失控項目的試劑,重測質(zhì)控。確認化學(xué)發(fā)光免疫分析儀的定標曲線(xiàn)在穩定期內進(jìn)行該操作。如果結果在控,說(shuō)明之前上機的試劑可能有問(wèn)題,檢查它們的使用有效期和上機有效期,或咨詢(xún)廠(chǎng)家該批試劑信息,以查明問(wèn)題所在。如果結果仍不在允許范圍,則進(jìn)行下一步。
4.重新校準失控項目,重測質(zhì)控。首先化學(xué)發(fā)光免疫分析儀的定標曲線(xiàn)超出穩定期是要重新進(jìn)行定標的,也只有確定定標曲線(xiàn)在有效期范圍內才能進(jìn)行2、3步的操作。如果定標曲線(xiàn)在穩定期內,不到萬(wàn)不得已不會(huì )用新的校準品校準儀器。如果重新校準后結果在控,說(shuō)明之前的校準品有問(wèn)題,檢查之前校準品的有效期、儲存環(huán)境或詢(xún)問(wèn)廠(chǎng)家該校準品信息。如果結果仍不在允許范圍,只有和儀器或試劑廠(chǎng)家請求他們的技術(shù)支援了。