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化學(xué)發(fā)光試劑分析生物的原理
更新時(shí)間：2016-08-11瀏覽：1488次
本文為您詳細介紹以下知識.有機化合物的化學(xué)發(fā)光試劑,有機化合物的同系物結構和性質(zhì)相似，使單一組分的測定碰到困難，因此有機化合物同系物的分析常與 HPLC 相結合。有機酸的化學(xué)發(fā)光分析 ( 見(jiàn)表 3) ，一般是先將其衍天生熒光物質(zhì)經(jīng)色譜分離后進(jìn)行化學(xué)發(fā)光檢測。但衍生法有如下的缺點(diǎn) : (1) 衍生反應不* ; (2) 衍生物穩定性差，要求及時(shí)檢測 ; (3) 限制了分離方法和條件的選擇。由于衍生產(chǎn)物的性質(zhì)與待測物不同，導致分離效率和分辨率下降，同時(shí)增加分析的時(shí)間和勞動(dòng)強度。在臨床醫學(xué)上，草酸是一個(gè)重要的檢測項目，可以直接用氧化化學(xué)發(fā)光反應測定尿液和草酸二乙酯中的草酸鹽及游離的草酸。另外還可以測定苯酮尿癥病人的尿液的苯丙酮酸的含量，方法是先在堿性條件下將苯丙酮酸氧化成 1 ， 22 二氧雜環(huán)丁烷類(lèi)化合物，然后裂解產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光。另外可以將 Fe （ III ）草酸配合物光解得到 Fe (II ) ，催化魯米諾－過(guò)氧化氫化學(xué)發(fā)光反應，此法線(xiàn)性范圍為 0 . 1 ～ 100uM 。此外酶聯(lián)偶合反應也可以用于某些有機酸的化學(xué)發(fā)光分析。
有機堿化學(xué)發(fā)光試劑,胺類(lèi)化合物*離子化電勢呈如下規律 : 伯胺 > 仲胺 > 叔胺，并隨碳鏈增長(cháng)，離子化電勢逐漸下降，因此叔胺化合物的檢測限較低，達 0 . 28 pM 。胺類(lèi)化合物的分析 ( 見(jiàn)表 4) ，較多的是經(jīng)柱前衍生天生熒光衍生物，分離后用過(guò)氧草酸鹽化學(xué)發(fā)光體系檢測，也可將其天生希夫堿或其它產(chǎn)物氧化而發(fā)光。有些堿如腎上腺素等可直接氧化而發(fā)光。通常有一個(gè)經(jīng)驗規則，假如一物質(zhì)具有熒光或其反應產(chǎn)物有熒光，該物質(zhì)一般可發(fā)生化學(xué)發(fā)光反應，但也有例外。嘌呤堿是核酸的基礎物質(zhì)，因此對嘌呤堿的分析測定將推動(dòng) DNA 分析方法的發(fā)展。在酸性醇液中腺嘌呤與苯甲醛反應，然后用過(guò)氧化氫氧化反應產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光，此法具有很好的選擇性，線(xiàn)性范圍為 1 . 5×10 － 7 ～ 5 . 0×10 － 7 M ，用此法測定鳥(niǎo)嘌呤靈敏度比熒光法高 20 倍。
氨基酸化學(xué)發(fā)光試劑,氨基酸分析方法的改進(jìn)有利于推動(dòng)生物技術(shù)、基因工程、 DNA 重組和基因克隆等的發(fā)展。由于盡大多數氨基酸沒(méi)有內源熒光特性，因此用過(guò)氧草酸鹽體系測定氨基酸需將其衍天生熒光物質(zhì)，但此法避免不了衍生法所固有的缺點(diǎn)。此外亦可通過(guò)測定氨基酸與氨基酸氧化酶反應產(chǎn)生的過(guò)氧化氫來(lái)測定氨基酸的含量，如 L 2 氨基酸經(jīng)反相色譜柱分離后流經(jīng) L 2 氨基酸氧化酶反應器產(chǎn)生過(guò)氧化氫，然后用過(guò)氧草酸鹽體系檢測。氨基酸與 Ru (b ipy) 3+3 反應，用活動(dòng)注射化學(xué)發(fā)光法檢測，相對于脯氨酸和天冬酰胺檢測限可分別達到 20 pmo l 和 50 pmo l 。一般來(lái)說(shuō)，仲胺反應產(chǎn)生的的發(fā)光強度比伯胺大。對氨基酸上取代基性質(zhì)研究表明，給電子基有利于增強化學(xué)發(fā)光強度。更多相關(guān)產(chǎn)品,請咨詢(xún)本.
