化學(xué)發(fā)光試劑使用方法

化學(xué)發(fā)光試劑使用方法：  

1.印跡膜制備按常規方法完成SDS-PAGE和電轉膜操作，適當的封閉非常重要?？梢酝ㄟ^(guò)標記一抗或二抗的手段引入HRP，一般采用市售的HRP二抗交聯(lián)物。仔細地淋洗對于降低背景非常重要，在與HRP交聯(lián)物溫育后，膜片更需仔細洗滌，所有步驟均在室溫下完成。  

2.化學(xué)發(fā)光試劑的配置在使用前等量混合A液和B液，混合后盡快使用。將膜片置混合液中于室溫下振蕩溫育2分鐘，每平方厘米膜片至少使用0.1-0.2ml以覆蓋全膜片。  

3.蛋白信號顯現  

1).用平頭鑷鉗住膜片，垂直置于吸水紙以吸去過(guò)量試劑。  

2).置膜片于二層保鮮膜之間，小心趕盡氣泡。  

3).將膜片吸附蛋白面朝上，置于X光片盒中。  

4).于暗室中壓上X光片。  

5).根據信號的強弱適當調整曝光時(shí)間，一般為1min或5min，也可選擇不同時(shí)間多次壓片，以達*效果。顯影沖洗。  

6).調節曝光時(shí)間，再次曝光顯影。